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タイトルDynamics of the Herpes simplex virus DNA polymerase holoenzyme during DNA synthesis and proof-reading revealed by Cryo-EM.
ジャーナル・号・ページNucleic Acids Res, Year 2024
掲載日2024年5月29日
著者Emil Gustavsson / Kay Grünewald / Per Elias / B Martin Hällberg /
PubMed 要旨Herpes simplex virus 1 (HSV-1), a double-stranded DNA virus, replicates using seven essential proteins encoded by its genome. Among these, the UL30 DNA polymerase, complexed with the UL42 ...Herpes simplex virus 1 (HSV-1), a double-stranded DNA virus, replicates using seven essential proteins encoded by its genome. Among these, the UL30 DNA polymerase, complexed with the UL42 processivity factor, orchestrates leading and lagging strand replication of the 152 kb viral genome. UL30 polymerase is a prime target for antiviral therapy, and resistance to current drugs can arise in immunocompromised individuals. Using electron cryo-microscopy (cryo-EM), we unveil the dynamic changes of the UL30/UL42 complex with DNA in three distinct states. First, a pre-translocation state with an open fingers domain ready for nucleotide incorporation. Second, a halted elongation state where the fingers close, trapping dATP in the dNTP pocket. Third, a DNA-editing state involving significant conformational changes to allow DNA realignment for exonuclease activity. Additionally, the flexible UL30 C-terminal domain interacts with UL42, forming an extended positively charged surface binding to DNA, thereby enhancing processive synthesis. These findings highlight substantial structural shifts in the polymerase and its DNA interactions during replication, offering insights for future antiviral drug development.
リンクNucleic Acids Res / PubMed:38806233
手法EM (単粒子)
解像度1.87 - 3.11 Å
構造データ

EMDB-16906, PDB-8oj6:
HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in pre-translocation state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.41 Å

EMDB-16907, PDB-8oj7:
HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in halted elongation state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.46 Å

EMDB-16909, PDB-8oja:
HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in exonuclease state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 1.87 Å

EMDB-16910, PDB-8ojb:
HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in exonuclease state active site
手法: EM (単粒子) / 解像度: 1.9 Å

EMDB-16911, PDB-8ojc:
HSV-1 DNA polymerase active site in alternative exonuclease state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.08 Å

EMDB-16912, PDB-8ojd:
HSV-1 DNA polymerase beta-hairpin loop
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.46 Å

EMDB-16918: Focused refinement map of HSV-1 DNA polymerase in pre-translocation state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.4 Å

EMDB-16919: Focused refinement map of HSV-1 DNA polymerase processivity factor in pre-translocation state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.11 Å

EMDB-16924: Focused refinement of HSV-1 DNA polymerase in halted elongation state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.42 Å

EMDB-16925: Focused refinement of HSV-1 DNA polymerase processivity factor in halted elongation state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.97 Å

EMDB-16927: Focused refinement map of HSV-1 DNA polymerase in exonuclease state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 1.89 Å

EMDB-16928: Focused refinement map of HSV-1 DNA polymerase processivity factor in exonuclease state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.35 Å

EMDB-17013: HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in halted elongation state consensus map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.4 Å

EMDB-17014: Consensus map of HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in pre-translocation state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.41 Å

EMDB-17018: Consensus map of HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in exonuclease state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.03 Å

EMDB-19837, PDB-9enp:
HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in exonuclease state with 1-bp DNA mismatch
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.12 Å

EMDB-19838, PDB-9enq:
HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in exonuclease state active site with 1-bp DNA mismatch
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.12 Å

EMDB-19839: HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in exonuclease state with 1-bp DNA mismatch consensus map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.23 Å

EMDB-19840: HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in exonuclease state with 1-bp DNA mismatch catalytic core focused map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.1 Å

EMDB-19841: HSV-1 DNA polymerase-processivity factor complex in exonuclease state with 1-bp DNA mismatch processivity factor focused refinement
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.87 Å

化合物

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-HOH:
WATER /

ChemComp-DTP:
2'-DEOXYADENOSINE 5'-TRIPHOSPHATE / dATP / デオキシアデノシン三リン酸

ChemComp-CA:
Unknown entry / カルシウムジカチオン

由来
  • human alphaherpesvirus 1 strain kos (ヘルペスウイルス)
  • synthetic construct (人工物)
キーワードTRANSFERASE (転移酵素) / DNA (デオキシリボ核酸) / Polymerase (ポリメラーゼ) / Complex

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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