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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-19780
タイトルin situ subtomogram average of C. elegans gamma-tubulin ring complexes in mitotic centrosomes
マップデータGamma-TuRC average
試料
  • 細胞: Dissociated C. elegans embryonic cells
キーワードMicrotubule (微小管) / gamma-tubulin / 11-protofilaments / cryo-ET / cryo-FIB / C. elegans (カエノラブディティス・エレガンス) / mitosis (有糸分裂) / centrosome (中心体) / CELL CYCLE (細胞周期)
生物種Caenorhabditis elegans (センチュウ)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 37.0 Å
データ登録者Tollervey F / Rios MU / Zagoriy I / Woodruff JB / Mahamid J
資金援助European Union, 1件
OrganizationGrant number
European Research Council (ERC)760067European Union
引用ジャーナル: bioRxiv / : 2024
タイトル: Native molecular architectures of centrosomes in embryos.
著者: Fergus Tollervey / Manolo U Rios / Evgenia Zagoriy / Jeffrey B Woodruff / Julia Mahamid /
要旨: Centrosomes organize microtubules that are essential for mitotic divisions in animal cells. They consist of centrioles surrounded by Pericentriolar Material (PCM). Questions related to mechanisms of ...Centrosomes organize microtubules that are essential for mitotic divisions in animal cells. They consist of centrioles surrounded by Pericentriolar Material (PCM). Questions related to mechanisms of centriole assembly, PCM organization, and microtubule formation remain unanswered, in part due to limited availability of molecular-resolution structural analyses . Here, we use cryo-electron tomography to visualize centrosomes across the cell cycle in cells isolated from embryos. We describe a pseudo-timeline of centriole assembly and identify distinct structural features including a cartwheel in daughter centrioles, and incomplete microtubule doublets surrounded by a star-shaped density in mother centrioles. We find that centriole and PCM microtubules differ in protofilament number (13 versus 11) indicating distinct nucleation mechanisms. This difference could be explained by atypical γ-tubulin ring complexes with 11-fold symmetry identified at the minus ends of short PCM microtubules. We further characterize a porous and disordered network that forms the interconnected PCM. Thus, our work builds a three-dimensional structural atlas that helps explain how centrosomes assemble, grow, and achieve function.
履歴
登録2024年3月3日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年4月24日-
マップ公開2024年4月24日-
更新2024年4月24日-
現状2024年4月24日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_19780.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 12.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Gamma-TuRC average
ボクセルのサイズX=Y=Z: 6.7404 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.181
最小 - 最大-0.47791713 - 0.78702086
平均 (標準偏差)0.0006678503 (±0.05158188)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ148148148
Spacing148148148
セルA=B=C: 997.57916 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_19780_msk_1.map
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: Half map group 1

ファイルemd_19780_half_map_1.map
注釈Half map group 1
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: Half map group 2

ファイルemd_19780_half_map_2.map
注釈Half map group 2
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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試料の構成要素

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全体 : Dissociated C. elegans embryonic cells

全体名称: Dissociated C. elegans embryonic cells
要素
  • 細胞: Dissociated C. elegans embryonic cells

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超分子 #1: Dissociated C. elegans embryonic cells

超分子名称: Dissociated C. elegans embryonic cells / タイプ: cell / ID: 1 / 親要素: 0
由来(天然)生物種: Caenorhabditis elegans (センチュウ) / 組織: Embryo

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態cell

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
グリッドモデル: Quantifoil / 材質: GOLD / メッシュ: 200 / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 45 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.037 kPa
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.5 µm
特殊光学系位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k)
検出モード: INTEGRATING / 平均電子線量: 120.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

抽出トモグラム数: 4 / 使用した粒子像数: 281 / 参照モデル: featureless tube
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 4.0.1)
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 37.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 4.0.1) / 使用したサブトモグラム数: 281
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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