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- EMDB-40603: GPR161 Gs heterotrimer -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-40603
タイトルGPR161 Gs heterotrimer
マップデータMap of full complex, sharpened
試料
  • 複合体: GPR161 Gs heterotrimeric complex with Nb35
    • 複合体: G-protein coupled receptor 161, Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short
      • タンパク質・ペプチド: G-protein coupled receptor 161
      • タンパク質・ペプチド: Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short
    • 複合体: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2, Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1
      • タンパク質・ペプチド: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2
      • タンパク質・ペプチド: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1
    • 複合体: Nanobody 35ナノボディ
      • タンパク質・ペプチド: Nanobody 35ナノボディ
  • リガンド: CHOLESTEROLコレステロール
キーワードGPCR (Gタンパク質共役受容体) / orphan (孤児) / active / Hedgehog (ハリネズミ) / MEMBRANE PROTEIN (膜タンパク質)
機能・相同性
機能・相同性情報


negative regulation of smoothened signaling pathway involved in dorsal/ventral neural tube patterning / ciliary membrane / glial cell projection / PKA activation in glucagon signalling / hair follicle placode formation / developmental growth / D1 dopamine receptor binding / intracellular transport / Hedgehog 'off' state / positive regulation of cAMP-mediated signaling ...negative regulation of smoothened signaling pathway involved in dorsal/ventral neural tube patterning / ciliary membrane / glial cell projection / PKA activation in glucagon signalling / hair follicle placode formation / developmental growth / D1 dopamine receptor binding / intracellular transport / Hedgehog 'off' state / positive regulation of cAMP-mediated signaling / adenylate cyclase-activating adrenergic receptor signaling pathway / activation of adenylate cyclase activity / adenylate cyclase activator activity / trans-Golgi network membrane / G protein-coupled receptor activity / Hedgehog 'on' state / Olfactory Signaling Pathway / G-protein beta/gamma-subunit complex binding / Activation of the phototransduction cascade / / G beta:gamma signalling through PLC beta / Presynaptic function of Kainate receptors / Thromboxane signalling through TP receptor / G-protein activation / G protein-coupled acetylcholine receptor signaling pathway / Activation of G protein gated Potassium channels / Inhibition of voltage gated Ca2+ channels via Gbeta/gamma subunits / 繊毛 / adenylate cyclase-activating G protein-coupled receptor signaling pathway / Prostacyclin signalling through prostacyclin receptor / Glucagon signaling in metabolic regulation / G beta:gamma signalling through CDC42 / ADP signalling through P2Y purinoceptor 12 / G beta:gamma signalling through BTK / recycling endosome / Synthesis, secretion, and inactivation of Glucagon-like Peptide-1 (GLP-1) / Sensory perception of sweet, bitter, and umami (glutamate) taste / 血小板 / photoreceptor disc membrane / 認識 / Adrenaline,noradrenaline inhibits insulin secretion / Glucagon-type ligand receptors / positive regulation of GTPase activity / Vasopressin regulates renal water homeostasis via Aquaporins / G alpha (z) signalling events / cellular response to catecholamine stimulus / Glucagon-like Peptide-1 (GLP1) regulates insulin secretion / ADORA2B mediated anti-inflammatory cytokines production / ADP signalling through P2Y purinoceptor 1 / adenylate cyclase-activating dopamine receptor signaling pathway / G beta:gamma signalling through PI3Kgamma / cellular response to prostaglandin E stimulus / Cooperation of PDCL (PhLP1) and TRiC/CCT in G-protein beta folding / sensory perception of taste / GPER1 signaling / endocytic vesicle membrane / G-protein beta-subunit binding / Inactivation, recovery and regulation of the phototransduction cascade / heterotrimeric G-protein complex / G alpha (12/13) signalling events / extracellular vesicle / signaling receptor complex adaptor activity / sensory perception of smell / Thrombin signalling through proteinase activated receptors (PARs) / retina development in camera-type eye / GTPase binding / Ca2+ pathway / phospholipase C-activating G protein-coupled receptor signaling pathway / positive regulation of cold-induced thermogenesis / G alpha (i) signalling events / fibroblast proliferation / G alpha (s) signalling events / G alpha (q) signalling events / Ras protein signal transduction / cell population proliferation / Extra-nuclear estrogen signaling / neuron projection / G protein-coupled receptor signaling pathway / lysosomal membrane / GTPase activity / シナプス / protein-containing complex binding / GTP binding / シグナル伝達 / extracellular exosome / 生体膜 / metal ion binding / 細胞膜 / 細胞質基質 / 細胞質
類似検索 - 分子機能
G-protein alpha subunit, group S / G-alpha domain profile. / Guanine nucleotide binding protein (G-protein), alpha subunit / G protein alpha subunit, helical insertion / G-protein alpha subunit / G protein alpha subunit / G-protein, gamma subunit / G-protein gamma subunit domain profile. / GGL domain / G-protein gamma-like domain superfamily ...G-protein alpha subunit, group S / G-alpha domain profile. / Guanine nucleotide binding protein (G-protein), alpha subunit / G protein alpha subunit, helical insertion / G-protein alpha subunit / G protein alpha subunit / G-protein, gamma subunit / G-protein gamma subunit domain profile. / GGL domain / G-protein gamma-like domain superfamily / G-protein gamma-like domain / GGL domain / G protein gamma subunit-like motifs / Guanine nucleotide-binding protein, beta subunit / G-protein, beta subunit / G-protein coupled receptors family 1 signature. / G protein-coupled receptor, rhodopsin-like / GPCR, rhodopsin-like, 7TM / G-protein coupled receptors family 1 profile. / 7 transmembrane receptor (rhodopsin family) / G-protein beta WD-40 repeat / WD40 repeat, conserved site / Trp-Asp (WD) repeats signature. / WD domain, G-beta repeat / WD40リピート / WD40リピート / Trp-Asp (WD) repeats profile. / Trp-Asp (WD) repeats circular profile. / WD40-repeat-containing domain superfamily / WD40/YVTN repeat-like-containing domain superfamily / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2 / Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1 / Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short / G-protein coupled receptor 161
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト) / Lama glama (ラマ)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.74 Å
データ登録者Hoppe N / Manglik A / Harrison S
資金援助 米国, 1件
OrganizationGrant number
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM138992 米国
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / : 2024
タイトル: GPR161 structure uncovers the redundant role of sterol-regulated ciliary cAMP signaling in the Hedgehog pathway.
著者: Nicholas Hoppe / Simone Harrison / Sun-Hee Hwang / Ziwei Chen / Masha Karelina / Ishan Deshpande / Carl-Mikael Suomivuori / Vivek R Palicharla / Samuel P Berry / Philipp Tschaikner / Dominik ...著者: Nicholas Hoppe / Simone Harrison / Sun-Hee Hwang / Ziwei Chen / Masha Karelina / Ishan Deshpande / Carl-Mikael Suomivuori / Vivek R Palicharla / Samuel P Berry / Philipp Tschaikner / Dominik Regele / Douglas F Covey / Eduard Stefan / Debora S Marks / Jeremy F Reiter / Ron O Dror / Alex S Evers / Saikat Mukhopadhyay / Aashish Manglik /
要旨: The orphan G protein-coupled receptor (GPCR) GPR161 plays a central role in development by suppressing Hedgehog signaling. The fundamental basis of how GPR161 is activated remains unclear. Here, we ...The orphan G protein-coupled receptor (GPCR) GPR161 plays a central role in development by suppressing Hedgehog signaling. The fundamental basis of how GPR161 is activated remains unclear. Here, we determined a cryogenic-electron microscopy structure of active human GPR161 bound to heterotrimeric G. This structure revealed an extracellular loop 2 that occupies the canonical GPCR orthosteric ligand pocket. Furthermore, a sterol that binds adjacent to transmembrane helices 6 and 7 stabilizes a GPR161 conformation required for G coupling. Mutations that prevent sterol binding to GPR161 suppress G-mediated signaling. These mutants retain the ability to suppress GLI2 transcription factor accumulation in primary cilia, a key function of ciliary GPR161. By contrast, a protein kinase A-binding site in the GPR161 C terminus is critical in suppressing GLI2 ciliary accumulation. Our work highlights how structural features of GPR161 interface with the Hedgehog pathway and sets a foundation to understand the role of GPR161 function in other signaling pathways.
履歴
登録2023年4月26日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年2月21日-
マップ公開2024年2月21日-
更新2024年3月20日-
現状2024年3月20日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_40603.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 91.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Map of full complex, sharpened
ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.86 Å
密度
表面レベル登録者による: 3.69
最小 - 最大-15.347412 - 32.036299999999997
平均 (標準偏差)-0.007862036 (±0.8172521)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ288288288
Spacing288288288
セルA=B=C: 247.68001 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: Map of full complex

ファイルemd_40603_additional_1.map
注釈Map of full complex
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: Half map A

ファイルemd_40603_half_map_1.map
注釈Half map A
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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ハーフマップ: Half map B

ファイルemd_40603_half_map_2.map
注釈Half map B
投影像・断面図
ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

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試料の構成要素

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全体 : GPR161 Gs heterotrimeric complex with Nb35

全体名称: GPR161 Gs heterotrimeric complex with Nb35
要素
  • 複合体: GPR161 Gs heterotrimeric complex with Nb35
    • 複合体: G-protein coupled receptor 161, Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short
      • タンパク質・ペプチド: G-protein coupled receptor 161
      • タンパク質・ペプチド: Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short
    • 複合体: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2, Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1
      • タンパク質・ペプチド: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2
      • タンパク質・ペプチド: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1
    • 複合体: Nanobody 35ナノボディ
      • タンパク質・ペプチド: Nanobody 35ナノボディ
  • リガンド: CHOLESTEROLコレステロール

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超分子 #1: GPR161 Gs heterotrimeric complex with Nb35

超分子名称: GPR161 Gs heterotrimeric complex with Nb35 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5

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超分子 #2: G-protein coupled receptor 161, Guanine nucleotide-binding protei...

超分子名称: G-protein coupled receptor 161, Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short
タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1, #4
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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超分子 #3: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2...

超分子名称: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2, Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1
タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2, #5
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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超分子 #4: Nanobody 35

超分子名称: Nanobody 35 / タイプ: complex / ID: 4 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3
由来(天然)生物種: Lama glama (ラマ)

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分子 #1: G-protein coupled receptor 161

分子名称: G-protein coupled receptor 161 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 59.869941 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: DYKDDDDASI DMSLNSSLSC RKELSNLTEE EGGEGGVIIT QFIAIIVITI FVCLGNLVIV VTLYKKSYLL TLSNKFVFSL TLSNFLLSV LVLPFVVTSS IRREWIFGVV WCNFSALLYL LISSASMLTL GVIAIDRYYA VLYPMVYPMK ITGNRAVMAL V YIWLHSLI ...文字列:
DYKDDDDASI DMSLNSSLSC RKELSNLTEE EGGEGGVIIT QFIAIIVITI FVCLGNLVIV VTLYKKSYLL TLSNKFVFSL TLSNFLLSV LVLPFVVTSS IRREWIFGVV WCNFSALLYL LISSASMLTL GVIAIDRYYA VLYPMVYPMK ITGNRAVMAL V YIWLHSLI GCLPPLFGWS SVEFDEFKWM CVAAWHREPG YTAFWQIWCA LFPFLVMLVC YGFIFRVARV KARKVHCGTV VI VEEDAQR TGRKNSSTST SSSGSRRNAF QGVVYSANQC KALITILVVL GAFMVTWGPY MVVIASEALW GKSSVSPSLE TWA TWLSFA SAVCHPLIYG LWNKTVRKEL LGMCFGDRYY REPFVQRQRT SRLFSISNRI TDLGLSPHLT ALMAGGQPLG HSSS TGDTG FSCSQDSGTD MMLLEDYTSD DNPPSHCTCP PKRRSSVTFE DEVEQIKEAA KNSILHVKAE VHKSLDSYAA SLAKA IEAE AKINLFGEEA LPGVLVTART VPGGGFGGRR GSRTLVSQRL QLQSIEEGDV LAAEQR

UniProtKB: G-protein coupled receptor 161

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分子 #2: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2

分子名称: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2
タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 7.861143 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列:
MASNNTASIA QARKLVEQLK MEANIDRIKV SKAAADLMAY CEAHAKEDPL LTPVPASENP FREKKFFCAI L

UniProtKB: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2

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分子 #3: Nanobody 35

分子名称: Nanobody 35 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Lama glama (ラマ)
分子量理論値: 15.398067 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
QVQLQESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS NYKMNWVRQA PGKGLEWVSD ISQSGASISY TGSVKGRFTI SRDNAKNTLY LQMNSLKPE DTAVYYCARC PAPFTRDCFD VTSTTYAYRG QGTQVTVSSG SEDQVDPRLI DGK

+
分子 #4: Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short

分子名称: Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short
タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 30.137025 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: GGSLEVLFQG PSGNSKTEDQ RNEEKAQREA NKKIEKQLQK DKQVYRATHR LLLLGADNSG KSTIVKQMRI LHGGSGGSGG TSGIFETKF QVDKVNFHMF DVGGQRDERR KWIQCFNDVT AIIFVVDSSD YNRLQEALNL FKSIWNNRWL RTISVILFLN K QDLLAEKV ...文字列:
GGSLEVLFQG PSGNSKTEDQ RNEEKAQREA NKKIEKQLQK DKQVYRATHR LLLLGADNSG KSTIVKQMRI LHGGSGGSGG TSGIFETKF QVDKVNFHMF DVGGQRDERR KWIQCFNDVT AIIFVVDSSD YNRLQEALNL FKSIWNNRWL RTISVILFLN K QDLLAEKV LAGKSKIEDY FPEFARYTTP EDATPEPGED PRVTRAKYFI RDEFLRISTA SGDGRHYCYP HFTCAVDTEN AR RIFNDCR DIIQRMHLRQ YELL

UniProtKB: Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short, Guanine nucleotide-binding protein G(s) subunit alpha isoforms short

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分子 #5: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1

分子名称: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1
タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 40.857641 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MHHHHHHLEV LFQGPEDQVD PRLIDGKGSS QSELDQLRQE AEQLKNQIRD ARKACADATL SQITNNIDPV GRIQMRTRRT LRGHLAKIY AMHWGTDSRL LVSASQDGKL IIWDSYTTNK VHAIPLRSSW VMTCAYAPSG NYVACGGLDN ICSIYNLKTR E GNVRVSRE ...文字列:
MHHHHHHLEV LFQGPEDQVD PRLIDGKGSS QSELDQLRQE AEQLKNQIRD ARKACADATL SQITNNIDPV GRIQMRTRRT LRGHLAKIY AMHWGTDSRL LVSASQDGKL IIWDSYTTNK VHAIPLRSSW VMTCAYAPSG NYVACGGLDN ICSIYNLKTR E GNVRVSRE LAGHTGYLSC CRFLDDNQIV TSSGDTTCAL WDIETGQQTT TFTGHTGDVM SLSLAPDTRL FVSGACDASA KL WDVREGM CRQTFTGHES DINAICFFPN GNAFATGSDD ATCRLFDLRA DQELMTYSHD NIICGITSVS FSKSGRLLLA GYD DFNCNV WDALKADRAG VLAGHDNRVS CLGVTDDGMA VATGSWDSFL KIWN

UniProtKB: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1

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分子 #6: CHOLESTEROL

分子名称: CHOLESTEROL / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 1 / : CLR
分子量理論値: 386.654 Da
Chemical component information

ChemComp-CLR:
CHOLESTEROL / コレステロ-ル / コレステロール

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.5
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡TFS KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 2.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 50.7 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.74 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 335928
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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