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万見
- EMDB-35688: Cas6f of Csy-AcrIF4-dsDNA -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-35688
タイトルCas6f of Csy-AcrIF4-dsDNA
マップデータ
試料
  • 複合体: Csy-AcrIF4-dsDNA
    • 複合体: Cas6f
    • 複合体: RNAリボ核酸
    • 複合体: DNAデオキシリボ核酸
キーワードIMMUNE SYSTEM-RNA-DNA complex (免疫系) / ANTIBIOTIC (抗生物質)
生物種Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.96 Å
データ登録者Feng Y / Zhang LX
資金援助 中国, 1件
OrganizationGrant number国
National Science Foundation (NSF, China)32171274 中国
引用ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2022
タイトル: Anti-CRISPR protein AcrIF4 inhibits the type I-F CRISPR-Cas surveillance complex by blocking nuclease recruitment and DNA cleavage.
著者: Zhengyu Gao / Laixing Zhang / Zihao Ge / Hao Wang / Yourun Yue / Zhuobing Jiang / Xin Wang / Chenying Xu / Yi Zhang / Maojun Yang / Yue Feng /
要旨: The clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-Cas system provides prokaryotes with protection against mobile genetic elements such as phages. In turn, phages deploy anti- ...The clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-Cas system provides prokaryotes with protection against mobile genetic elements such as phages. In turn, phages deploy anti-CRISPR (Acr) proteins to evade this immunity. AcrIF4, an Acr targeting the type I-F CRISPR-Cas system, has been reported to bind the crRNA-guided surveillance (Csy) complex. However, it remains controversial whether AcrIF4 inhibits target DNA binding to the Csy complex. Here, we present structural and mechanistic studies into AcrIF4, exploring its unique anti-CRISPR mechanism. While the Csy-AcrIF4 complex displays decreased affinity for target DNA, it is still able to bind the DNA. Our structural and functional analyses of the Csy-AcrIF4-dsDNA complex revealed that AcrIF4 binding prevents rotation of the helical bundle of the Cas8f subunit induced by dsDNA binding, therefore resulting in failure of nuclease Cas2/3 recruitment and DNA cleavage. Overall, our study provides an interesting example of attack on the nuclease recruitment event by an Acr, but not conventional mechanisms of blocking binding of target DNA.
履歴
登録2023年3月20日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年1月31日-
マップ公開2024年1月31日-
更新2024年1月31日-
現状2024年1月31日処理サイト: PDBj / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_35688.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_35688.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.97 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.007
最小 - 最大-0.008714917 - 0.027375555
平均 (標準偏差)0.00021637074 (±0.0014973796)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 194.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_35688_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_35688_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Csy-AcrIF4-dsDNA

全体名称: Csy-AcrIF4-dsDNA
要素
  • 複合体: Csy-AcrIF4-dsDNA
    • 複合体: Cas6f
    • 複合体: RNAリボ核酸
    • 複合体: DNAデオキシリボ核酸

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超分子 #1: Csy-AcrIF4-dsDNA

超分子名称: Csy-AcrIF4-dsDNA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#8
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)

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超分子 #2: Cas6f

超分子名称: Cas6f / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#5
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)

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超分子 #3: RNA

超分子名称: RNA / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #6
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)

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超分子 #4: DNA

超分子名称: DNA / タイプ: complex / ID: 4 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #7-#8

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: OTHER / 撮影モード: DARK FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.7 µm
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 50.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: OTHER
初期 角度割当タイプ: OTHER
最終 角度割当タイプ: OTHER
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.96 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 93188
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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