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タイトルAccelerated cryo-EM-guided determination of three-dimensional RNA-only structures.
ジャーナル・号・ページNat Methods, Vol. 17, Issue 7, Page 699-707, Year 2020
掲載日2020年7月2日
著者Kalli Kappel / Kaiming Zhang / Zhaoming Su / Andrew M Watkins / Wipapat Kladwang / Shanshan Li / Grigore Pintilie / Ved V Topkar / Ramya Rangan / Ivan N Zheludev / Joseph D Yesselman / Wah Chiu / Rhiju Das /
PubMed 要旨The discovery and design of biologically important RNA molecules is outpacing three-dimensional structural characterization. Here, we demonstrate that cryo-electron microscopy can routinely resolve ...The discovery and design of biologically important RNA molecules is outpacing three-dimensional structural characterization. Here, we demonstrate that cryo-electron microscopy can routinely resolve maps of RNA-only systems and that these maps enable subnanometer-resolution coordinate estimation when complemented with multidimensional chemical mapping and Rosetta DRRAFTER computational modeling. This hybrid 'Ribosolve' pipeline detects and falsifies homologies and conformational rearrangements in 11 previously unknown 119- to 338-nucleotide protein-free RNA structures: full-length Tetrahymena ribozyme, hc16 ligase with and without substrate, full-length Vibrio cholerae and Fusobacterium nucleatum glycine riboswitch aptamers with and without glycine, Mycobacterium SAM-IV riboswitch with and without S-adenosylmethionine, and the computer-designed ATP-TTR-3 aptamer with and without AMP. Simulation benchmarks, blind challenges, compensatory mutagenesis, cross-RNA homologies and internal controls demonstrate that Ribosolve can accurately resolve the global architectures of RNA molecules but does not resolve atomic details. These tests offer guidelines for making inferences in future RNA structural studies with similarly accelerated throughput.
リンクNat Methods / PubMed:32616928 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度4.7 - 11.0 Å
構造データ

EMDB-21831: ATP-TTR-3 with AMP
PDB-6wlj: ATP-TTR-3 with AMP models, 9.6 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 9.6 Å

EMDB-21832: Apo ATP-TTR-3
PDB-6wlk: Apo ATP-TTR-3 models, 10.0 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 10.0 Å

EMDB-21833: Apo F. nucleatum glycine riboswitch
PDB-6wll: Apo F. nucleatum glycine riboswitch models, 10.0 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 10.0 Å

EMDB-21834: F. nucleatum glycine riboswitch with glycine
PDB-6wlm: F. nucleatum glycine riboswitch with glycine models, 7.4 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.4 Å

EMDB-21835: hc16 ligase product
PDB-6wln: hc16 ligase product models, 10.0 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 10.0 Å

EMDB-21836: hc16 ligase
PDB-6wlo: hc16 ligase models, 11.0 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 11.0 Å

EMDB-21838: Apo SAM-IV riboswitch
PDB-6wlq: Apo SAM-IV riboswitch models, 4.7 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.7 Å

EMDB-21839: SAM-IV riboswitch with SAM
PDB-6wlr: SAM-IV riboswitch with SAM models, 4.8 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.8 Å

EMDB-21840, PDB-6wls:
Tetrahymena ribozyme models, 6.8 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 6.8 Å

EMDB-21841: Apo V. cholerae glycine riboswitch
PDB-6wlt: Apo V. cholerae glycine riboswitch models, 4.8 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.8 Å

EMDB-21842: V. cholerae glycine riboswitch with glycine
PDB-6wlu: V. cholerae glycine riboswitch with glycine models, 5.7 Angstrom resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 5.7 Å

由来
  • synthetic construct (人工物)
  • fusobacterium nucleatum (バクテリア)
  • mycobacterium sp. (マイコバクテリウム属)
  • tetrahymena thermophila (真核生物)
  • vibrio cholerae (コレラ菌)
キーワードRNA (リボ核酸) / aptamer (アプタマー) / riboswitch (リボスイッチ) / ribozyme (リボザイム)

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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